㈠ 關於過柱子的幾點疑問，敬請高手回答
過柱子的時候我用的是濕法裝柱，展開劑是乙酸乙酯和石油醚比例為1：5，產品rf值為0.23，雜質點rf值為0.43（1）請問洗脫劑該怎麼配製樣品雜質不是很多，可以用乙酸乙酯和石油醚比例為1：5為洗脫劑；雜質多或分離效果差，可以把樣品rf值調到0.16-0.18左右。（2）裝柱前是用洗脫劑拌硅膠還是用極性小的石油醚來拌都可以（3）上樣前是用洗脫劑還是用極性小的石油醚來淋洗柱子都可以，習慣用極性小的石油醚來淋洗柱子（4）濕法上樣，樣品用什麼溶解，是用洗脫劑嗎洗脫劑對樣品溶解性好，可以用洗脫劑；溶解性不好建議干法上樣。祝你好運
㈡ 硅膠層析的硅膠柱層析技術
硅膠柱層析原理
硅膠層析法的分離原理是根據物質在硅膠上的吸附力不同而得到分離， 一般情況下極性較大的物質易被硅膠吸附，極性較弱的物質不易被硅膠吸附，整個層析過程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸過程。
硅膠柱層析流動相
極性小的用乙酸乙酯：石油醚洗脫；極性較大的用甲醇：氯仿洗脫；極性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸洗脫；拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸
硅膠柱層析慣用方法 稱量。200-300目硅膠，稱30-70倍於上樣量；如果極難分，也可以用100倍量的硅膠H。干硅膠的視密度在0.4左右，所以要稱40g硅膠，用燒杯量100ml也可以。 攪成勻漿。加入干硅膠體積一倍的溶劑用玻璃棒充分攪拌。如果洗脫劑是石油醚/乙酸乙酯/丙酮體系，就用石油醚拌；如果洗脫劑是氯仿/醇體系，就用氯仿拌。如果不能攪成勻漿，說明溶劑中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不與水配伍走分配色譜的話，必須預先用無水硫酸鈉久置乾燥。氯仿用無水氯化鈣乾燥，以除去1%的醇。如果樣品對酸敏感，不能用氯仿體系過柱。 裝柱。將柱底用棉花塞緊，不必用海沙，加入約1/3體積石油醚（氯仿），裝上蓄液球，打開柱下活塞，將勻漿一次傾入蓄液球內。隨著沉降，會有一些硅膠沾在蓄液球內，用石油醚（氯仿）將其沖入柱中。 壓實。沉降完成後，加入更多的石油醚，用雙聯球或氣泵加壓，直至流速恆定。柱床約被壓縮至9/10體積。無論走常壓柱或加壓柱，都應進行這一步，可使分離度提高很多，且可以避免過柱時由於柱床萎縮產生開裂。 上樣。干法濕法都可以。海沙是沒必要的。上樣後，加入一些洗脫劑，再將一團脫脂棉塞至接近硅膠表面。然後就可以放心地加入大量洗脫劑，而不會沖壞硅膠表面。 過柱和收集。柱層析實際上是在擴散和分離之間的權衡。太低的洗脫強度並不好，推薦用梯度洗脫。收集的例子：10mg上樣量，1g硅膠H，0.5ml收一餾分；1-2g上樣量，50g硅膠（200-300目），20-50ml收一餾分。 檢測。要更多地使用專用噴顯劑，如果僅用紫外燈，會損失較多產品，紫外的靈敏度一般比噴顯劑底1-2個數量級。 送譜。收集的產品旋干，在送譜前通常需要重結晶。如果樣品太少或為液體，可過一小凝膠柱，作為送譜前的最後純化手段。可除去氫譜1.5ppm左右所謂的「硅膠」峰。
㈢ 過大柱子，石油醚和二氯可以當溶劑嗎
過大柱子，石油醚和二氯甲烷是可以當溶劑使用的。先用石油醚充柱子，然後逐漸的增加石油醚與二氯甲烷的比例。產物就會在某個極性階段下來。常見的是石油醚與乙酸乙酯，運用二氯甲烷代替乙酸乙酯也是可以的了。
㈣ 硅膠柱層析的洗脫劑可以選用石油醚，甲醇嗎
常用的洗脫劑包括：石油醚、正己烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇等良溶劑；根據需要，四氫呋喃、二甲亞碸之類的溶劑也都可以嘗試；
石油醚的極性較低、甲醇的極性較高；
通常來說，最好先在薄層層析板上先試試，然後再上柱子