㈠ 关于过柱子的几点疑问，敬请高手回答
过柱子的时候我用的是湿法装柱，展开剂是乙酸乙酯和石油醚比例为1：5，产品rf值为0.23，杂质点rf值为0.43（1）请问洗脱剂该怎么配制样品杂质不是很多，可以用乙酸乙酯和石油醚比例为1：5为洗脱剂；杂质多或分离效果差，可以把样品rf值调到0.16-0.18左右。（2）装柱前是用洗脱剂拌硅胶还是用极性小的石油醚来拌都可以（3）上样前是用洗脱剂还是用极性小的石油醚来淋洗柱子都可以，习惯用极性小的石油醚来淋洗柱子（4）湿法上样，样品用什么溶解，是用洗脱剂吗洗脱剂对样品溶解性好，可以用洗脱剂；溶解性不好建议干法上样。祝你好运
㈡ 硅胶层析的硅胶柱层析技术
硅胶柱层析原理
硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离， 一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。
硅胶柱层析流动相
极性小的用乙酸乙酯：石油醚洗脱；极性较大的用甲醇：氯仿洗脱；极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸洗脱；拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸
硅胶柱层析惯用方法 称量。200-300目硅胶，称30-70倍于上样量；如果极难分，也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右，所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。 搅成匀浆。加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系，就用石油醚拌；如果洗脱剂是氯仿/醇体系，就用氯仿拌。如果不能搅成匀浆，说明溶剂中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不与水配伍走分配色谱的话，必须预先用无水硫酸钠久置干燥。氯仿用无水氯化钙干燥，以除去1%的醇。如果样品对酸敏感，不能用氯仿体系过柱。 装柱。将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3体积石油醚（氯仿），装上蓄液球，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内。随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用石油醚（氯仿）将其冲入柱中。 压实。沉降完成后，加入更多的石油醚，用双联球或气泵加压，直至流速恒定。柱床约被压缩至9/10体积。无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。 上样。干法湿法都可以。海沙是没必要的。上样后，加入一些洗脱剂，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。然后就可以放心地加入大量洗脱剂，而不会冲坏硅胶表面。 过柱和收集。柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。太低的洗脱强度并不好，推荐用梯度洗脱。收集的例子：10mg上样量，1g硅胶H，0.5ml收一馏分；1-2g上样量，50g硅胶（200-300目），20-50ml收一馏分。 检测。要更多地使用专用喷显剂，如果仅用紫外灯，会损失较多产品，紫外的灵敏度一般比喷显剂底1-2个数量级。 送谱。收集的产品旋干，在送谱前通常需要重结晶。如果样品太少或为液体，可过一小凝胶柱，作为送谱前的最后纯化手段。可除去氢谱1.5ppm左右所谓的“硅胶”峰。
㈢ 过大柱子，石油醚和二氯可以当溶剂吗
过大柱子，石油醚和二氯甲烷是可以当溶剂使用的。先用石油醚充柱子，然后逐渐的增加石油醚与二氯甲烷的比例。产物就会在某个极性阶段下来。常见的是石油醚与乙酸乙酯，运用二氯甲烷代替乙酸乙酯也是可以的了。
㈣ 硅胶柱层析的洗脱剂可以选用石油醚，甲醇吗
常用的洗脱剂包括：石油醚、正己烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇等良溶剂；根据需要，四氢呋喃、二甲亚砜之类的溶剂也都可以尝试；
石油醚的极性较低、甲醇的极性较高；
通常来说，最好先在薄层层析板上先试试，然后再上柱子