① 种质资源怎样进行保存
使果树种质资源不至散失，并能延续下去的资源研究工作内容之一。当自然环境发生剧烈变化，诸如洪涝、干旱、严寒、病虫害的大面积发生等，都能够导致种质资源的散失以至灭绝。人类的社会活动，大规模的经济建设，特别是随着现代科学技术的高度发展，加速了对自然界的开发，环境污染，滥伐森林，过度垦荒等又进一步加重生态环境的恶化，加剧了种质资源的散失。现代化的农业生产中，出于集约化的管理和对产量、品质等方面的要求，良种化程度越来越高，使用的品种日趋减少，许多地方品种以及野生资源被闲置或淘汰，也造成了种质资源的大量散失。为了进一步改良现有栽培品种和不断发掘新作物的需要，必须重视种质资源的保存。
保存的范围
包括：①国内外栽培品种中的新、老品种和地方品种；②近缘野生种；③有潜在利用价值的野生种、变种、品系。一些地方品种或野生种，尽管品质或产量不够理想，但具有某些突出的特性，如抗逆性强、适应性广等等，都是宝贵的种质资源，应该妥善保存。对一些濒危的种质资源，更要及时收集，避免失去。
保存的方法
大多数果树用无性繁殖，这与用种子进行繁殖的粮食和蔬菜等作物、在种质资源的保存方法上有很大不同。果树种质资源的保存可分为植株保存和离体保存。
植株保存
又分为就地保存和迁地保存。就地保存是在种质资源原来所处的生态环境中，不经迁移，采取措施加以保护，如划定各级自然保护区、国家公园等。适于保存成片或濒危的野生资源。又如人工圈护适于保存稀有的良种单株；历史上遗留下来的珍贵古树。就地保存的优点在于可以使种质资源在适宜的环境条件下继续生存下去，利于保持种质的稳定和延续；所用成本较少，保存个体较多，同时在研究其起源、演变、发展、生态条件等方面都有参考价值。缺点在于其所处环境往往偏僻，管理、调查都不方便。迁地保存是将种质资源从原产地或次生地引出，置于种质库、种质资源圃、品种资源圃、原始材料圃等圃地加以保存。以种质资源圃栽植保存果树种质资源，可以相对集中地保存较多数量，采用良好的栽培措施，妥善管理和保护。在保存的同时可以进行系统观察和鉴定，积累数据资料，可以提供培育新品种的杂交亲本；以及繁育良种用于生产。对多年生的果树种质资源来说，栽植保存是切实可行的办法。但是，圃地栽植保存因果树植株高大，占地广，树种、品种之间性状不一，不易管理，投资较多；每一品种（系）只能保存少数植株，容易受自然灾害或病虫害的威胁而造成重大损失；为长期保存起见，在栽植一定年份后（多年生果树植物15～20年）需要进行更新。
资源圃选址应考虑：①具有适合该树种生存的气候和土条件，无环境污染和严重病虫为害；②有果树栽培的基础和设备条件：③交通便利，便于科研、教学活动和交流。资源圃的建园规划如道路、灌溉系统、防风林的设计等，按果园建园（见果园规划）的要求进行。株行距根据该树种盛果期树的冠径、土壤条件、栽培方式等综合考虑确定。如果通过修剪控制树冠，可适当密植。保存株数因树种和品种而异，乔木果树每品种保存3～5株，灌木和藤本果树6～8株，草本的20～25株，珍贵资源还可以适当增加株数。植株要按树种、栽培品种、野生种类等分门别类进行定植。同一树种当中按成熟期的顺序排列，以便管理和观察。为了节约土地、便于管理，国外曾试验用矮化砧高度密植保存品种，但发现高度密植时根系交错，病毒病、根部病害构成危害，如何在实际上应用，尚需研究解决。利用盆栽或者直接栽植于温室或网室，可以使种质资源避开不利条件和病毒及某些病虫害的侵袭。由于温室、网室成本高，空间有限，管理费工，只适于保存少数珍稀的种质资源，难以保存大量种质资源。
离体保存
是在适宜的条件下，用种子、花粉、休眠枝条、分生组织等保存种质资源。离体保存具有保存数量多，便于繁殖，节约土地和劳力，避免不良条件影响等优点。但是有许多实际困难还需要研究解决。
种子保存
简便易行，但大多数栽培果树用种子繁殖不能保持种质稳定不变。因此，除少数树种（包括实生砧木及野生果树种子）可保存种子之外，多数树种靠种子保存种质资源尚无实际意义。一部分以种子繁殖的果树如核桃、山核桃、栗、榛、人心果、香榧等，当它们的种子含水量降低到12～31%（因种类而不同）时，生活力即下降，这类种子被称为顽拗型（recal-ci trant）种子，尚无妥当的长期保存方法。
花粉保存
在适宜条件下，存贮花粉以达到保存种质的目的。影响花粉生活力的因素与种子类似，主要是温度与水分。花粉的贮存年限远较种子为短。蔷薇科（Rosaceae）、松科（Pinaceae）等的花粉寿命较长。日本的后泽、涩川报道（1951年）苹果花粉在-20℃条件下贮藏达9年。维塞（Tys Visser 1955年）将苹果花粉贮藏在液态空气中（-190℃）经2年花粉仍保持新鲜。由于贮藏条件了解不够，用花粉长期保存种质资源在目前还有困难。贮藏的花粉用来进行果树品种的改良虽具有实际意义，但花粉并不能保持原来种质的稳定延续，还存在着如何用花粉重新组合成原来二倍体植株的难题。
营养体保存
休眠期的枝条在低温（-2～2℃）保湿（相对湿度96～98%，可包塑料薄膜保持适宜范围）条件下可以短期贮藏。但是，保存种质资源起码要求贮藏10年，果树营养体长期冷冻贮藏的技术，现时还未达到实用阶段。日本曾开展了多年生木本果树种质资源长期保存的研究，1976年报道在5℃条件下，已成功地将葡萄、梨等的插条、接穗保存2年。酒井昭（1977年）发现：将苹果枝条通过逐步降温至-40℃的预冷，然后置于液氮（-70～-90℃）中冷冻保存，木质部在-40℃即受冻，但韧皮部和休眠芽在-90℃仍能生存，枝条融解后芽接成活率可达80%，长期贮存时的条件，适宜贮藏的营养体，贮藏期间的安全性、以及如何进行再繁殖等都有待深入研究。
分生组织保存
高等植物的分生组织有胚的特性，可以分化出新的组织和器官。这种特性及组织培养技术的发展，为使用分生组织保存种质资源提供了可能（见组织培养、茎尖培养）。利用分生组织繁殖新的个体，可以有很高的繁殖系数，并能提供无病毒、无病虫的个体。由分生组织育出的幼小植株、培养在琼脂培养基上面生长缓慢。每隔半年或一年转移带有适当叶片的茎段，能够使之不断延续下去，这样的植株称为分生无性系（mericlones）。这一技术对于保存那些有顽拗型种子的果树很有价值。
总括来说，如果单纯以保存种质资源为目的，离体保存开辟了一些新的途径，但如果同时要对种质资源进行观察和评价，则仍要进行栽植保存。在栽植保存中可以对种质资源的植物学特征、生物学特性、果实经济性状等进行系统观察，并按统一表格记载。无论何种保存方式都要有详细的记载档案（见资源记载档案）。
② 各国的蔬菜种质资源的收集与保存方法是什么
蔬菜种质资源搜集与保存是整个蔬菜种质资源工作的基础，只有通过广泛的收集与科学的保存，拥有相当数量的种质资源，才能更好地开展种质资源的评价和利用。
蔬菜种质资源的搜集方式主要有：一是通过国家行政部门或主管科研单位组织相对应的地方部门或种质资源研究单位，采用行政的（政府部门有组织的）手段对各地的蔬菜主产区、育种中心地区，进行广泛的收集；二是通过科研协作的形式，根据征集的目的和要求，进行经常性的征集；三是有关部门或单位组织人员对蔬菜作物起源中心地区、沙漠和沿海等边远地区，进行野生、野生近缘种质资源的考察和搜集；四是通过各种方式的国际交流，进行国外引种工作。在上述种质资源的征集过程中，对征集工作有统一的要求，对征集来的种质资源填写统一的表格，并将征集到的种子（苗）上交主管单位（方智远、李锡香，2004）。
世界各国都十分重视蔬菜种质资源的考察搜集工作。1920年始，苏联植物分类家瓦维洛夫（Н.И.Вавилов）组织考察队到60多个国家，进行了近200次考察，搜集到包括蔬菜在内的各种栽培植物15万份。由他创建的全苏植物栽培研究所到1985年共搜集保存农作物种质材料35万份左右，其中蔬菜（包括瓜、豆、块根类）种质材料6万份以上。美国从建国开始，至今已有200多年的历史，已经建立了一套完善的种质资源收集、研究、保存、利用的体制、机构和管理制度。美国原有的农作物种质资源贫乏，19世纪中叶开始组织出国考察搜集栽培植物种质材料，现已拥有世界各地栽培植物种质材料43万份以上，其中包括马铃薯、菜豆、豌豆等多种蔬菜作物。日本原有的蔬菜资源有限，许多蔬菜从古代起陆续由中国等国家和地区传入，近代则进一步搜集了世界各蔬菜起源地区的种质材料。除上述国家外，1974年成立的国际植物遗传资源委员会在促进世界各国考察搜集和保存栽培植物种质材料等方面做了许多工作。1974—1984年10年间建立并推动世界栽培植物种质搜集网搜集了各种栽培植物种质材料10万份以上（刘红，1990）。
目前，美国、俄罗斯、日本等国家投入大量人力、物力和财力进行蔬菜种质资源的收集和保存。
表1-4列出了世界各国代表性蔬菜种质资源搜集份数（含重复），包括长期保存和未获长期保存的种质。
表1-5列出了美国种质信息网络（GRIN）中常见的蔬菜种质份数（方智远、李锡香，2004）。
表1-6列出俄罗斯的情况。
表1-4 全世界代表性蔬菜的种资源质搜集份数
表1-5 美国GRIN数据库中主要蔬菜种质份数
表1-6 俄罗斯VIR收集保存的蔬菜种质资源
总的来说，俄罗斯收集和保存的豆类作物种质资源约有42000余份，包括15个属，160种。蔬菜和瓜类作物种质资源49000余份，包括282种。
中国对蔬菜种质资源的搜集保存工作十分重视。20世纪50年代中期至60年代初，开展了全国各省（直辖市、自治区）蔬菜地方品种的调查搜集工作。据1965年的不完全统计，共搜集到88种蔬菜1.73万份种子，但因“文化大革命”而几乎全部丢失。1979年，农业部和国家科委联合发出《关于开展农作物品种资源补充征集的通知》，1980年开始再次进行补充调查征集，至1985年底，全国已征集蔬菜地方品种125种，16187份。并从1982年开始，由当时的中国农业科学院蔬菜研究所牵头，组织全国各省（直辖市、自治区）编写《全国蔬菜地方品种资源目录》。在全国蔬菜品种资源调查、征集基础上，吉林、天津、安徽、山东、江苏、四川、河南、陕西等省（市）先后编制了本省（市）蔬菜品种资源目录。甘肃、吉林、江西、四川、湖南等省编写出本省蔬菜品种志。1986年开始，国家把种质资源工作列入国家重点科研计划，由中国农业科学院蔬菜花卉研究所组织全国各省（直辖市、自治区）蔬菜科研单位进一步进行了蔬菜种质资源的全面搜集、整理。并对云南省、西藏自治区、湖北神农架地区和海南省等地进行了蔬菜种质资源考察搜集，首次发现了一些有开发利用价值的蔬菜植物新变种、新类型和野生近缘种。如1979—1980年对云南省13个地（州、市）的31个市、县进行了考察，共收集种质材料400余份，制蜡叶标本100余份。鉴定出国内外尚无报道的苦茄、西双版纳黄瓜、涮辣、大树辣、辣椒瓜和红茄等。考察查明了云南省辣椒、黄瓜和瓜类的种类、类型、品种及其分布地区、不同海拔高度和生态环境。1981—1984年，中国农业科学院蔬菜花卉研究所参加了由该院品种资源研究所和西藏自治区农牧科学院主持组织的西藏作物品种考察队蔬菜考察组。共考察访问了39个县、市，搜集蔬菜种质材料655份，蔬菜种子285份（含根茎类），分属栽培蔬菜20个科60多个种，野生蔬菜种质资源23个科32个种，基本摸清了西藏自治区蔬菜种质资源的家底。其后，又于1986—1990年进行了神农架地区蔬菜种质资源考察，涉及鄂西和川东地区22个县（市、林区），收集蔬菜种质资源3497份，分属38个科159个种、亚种或变种。并对葱、蒜、菜豆、胡萝卜、辣椒、菠菜等蔬菜进行了重点考察，尤其对多种野生蔬菜进行了收集和研究（杜武峰、刘富中等，1991）。此后，在“九五”期间，四川、重庆等省（市）的蔬菜科研单位，还进行了三峡库区的蔬菜种质资源考察，收集到蔬菜种质资源959份，鉴定编目710份，初步筛选出25份优异种质资源（滕有德等，2002）。在此期间中国农业科学院蔬菜花卉研究所继续组织全国有关科研单位收集保存主要蔬菜地方品种、国外种质和野生蔬菜种质，共计达2005份。“十五”期间，依托国家基础性工作项目“蔬菜种质资源的收集和保存”，国家基础性工作项目“无性繁殖蔬菜种质资源的收集整理与利用”等，繁殖入库有性繁殖蔬菜种质538份，无性繁殖和多年生蔬菜种质资源计70种776份。
国外引种也是搜集种质资源的一种重要途径。随着对外开放政策的落实和国际交往的日益频繁，通过多种途径由国外引进了大批蔬菜种质资源，据不完全统计迄今总计已引入20000余份。在引入的种质资源中，如芦笋、青花菜、结球莴苣、黄秋葵、菜蓟、辣根等，作为新、特、稀蔬菜已在生产上推广应用，有效地丰富了国内栽培的蔬菜种类。又如番茄品种强力米寿、特罗皮克，西芹品种冬芹、夏芹，菜豆品种供给者、优胜者等从国外引入试种后表现优良，已直接用于生产；在直接引入的种质资源中，有的则是重要的育种材料，如抗烟草花叶病毒的番茄材料玛纳佩尔Tm-2，已用作亲本并育成了中蔬4号、西粉3号、苏抗9号等多个番茄优良新品种或一代杂种，成为生产上的主栽品种之一（尚庆茂等，1999）。
到目前为止，中国已收集的蔬菜种质资源共35580份，涉及214个种（包括变种，除去库圃重复收集的种类）。进入国家农作物种质资源库保存的计31417份，涉及21个科70属132个种（变种）。其中以菜豆、豇豆、辣椒、番茄、茄子、萝卜、大白菜、白菜、叶用芥菜、黄瓜、南瓜居多。无性繁殖的水生蔬菜计1538份，分属11个科12个属28个种和3个变种。其他以营养器官繁殖的蔬菜如葱蒜类、薯芋类和多年生蔬菜种质资源776份，分属70个种（李锡香，2006）。
表1-7 中国入库保存的蔬菜种类和种质份数
表1-7 中国入库保存的蔬菜种类和种质份数（续）-1
入圃水生蔬菜
入圃水生蔬菜（续）-1
如上所述，经过广大蔬菜种质资源工作者几十年的努力，基本上已把全国各地现存的较易收集保存的蔬菜种质进行了整理、繁殖入库和入圃。
关于种质资源的保护工作，国内外都十分重视。目前，国际上植物种质资源保护的方式有以下几种：一是原地保存，就是在自然生态环境下，就地保存野生植物群落或农田中的栽培植物居群，任其自我繁殖更新，如森林、草原、荒漠、湿地等各种类型的自然保护区。世界上第一个自然保护区是美国建立的黄石公园。近年来，自然保护区的发展很快，日本天然公园和自然保护区有700多个，总面积560万km以上，占国土面积的15%以上，为亚洲第一；美国的天然公园和自然保护区占国土面积的10%左右；中国至1982年底已建立自然保护区106个，面积390万km2，占国土面积的0.4%，保护了大量的野生动植物资源（李锡香，2004）。二是异地保存，是指将种子或植物体保存于该植物原产地以外的地方，主要形式有植物园、种质圃、种质库及试管苗库，还有超低温保存的营养体、花粉、细胞等等形式。
中国对蔬菜种质资源的保存主要有以下几种方式，一是低温种子库保存。国家在中国农业科学院原品种资源研究所建立了温度在-18℃的国家低温长期种子保存库和青海省的复份库，进行种子的长期保存，蔬菜种子也入库保存；在国家级的中国农业科学院蔬菜花卉研究所建立了温度在0℃左右的中期库，进行蔬菜种子的中期保存，并供国内外交流应用，在北京、上海、广东等地有条件的蔬菜（园艺）研究所（中心）也建有中期库。二是种质圃。主要保存不能用种子繁殖方式保存的水生蔬菜、营养繁殖蔬菜等。在水生蔬菜的保存方面，中国“国家种质武汉水生蔬菜资源圃”在湖北省武汉市蔬菜研究所建成，保存了来自全国二十多个省（市、区）百余县的水生蔬菜种质资源1700余份（含重复），它们分属于14个科30个种或变种（孔庆东，2005）。在河北省廊坊市中国农业科学院国际农业高新技术产业园建立了保存葱蒜类蔬菜、薯蓣类蔬菜、野生蔬菜和多年生蔬菜种质的“无性繁殖蔬菜种质资源圃”已保存了70余种蔬菜700余份种质。三是离体保存。中国农业科学院蔬菜花卉研究所新建了一个25m的组培操作间及培养室，2个约30m的离体保存库，库温分别为1～3℃和16～18℃。对收集的大蒜、生姜、百合等种质进行了复份保存。还探讨了大蒜和百合种质资源的超低温保存技术，并获得了成功。大蒜茎尖液氮冻存后最高成活率可达100%，再生植株遗传性稳定。不同基因型大蒜种质茎尖的冻存后成活率有一定差异。大蒜分化芽冻存后最高成活率为50%。百合组培苗茎尖液氮冻存后最高成活率可达52.6%。相关技术已经用于有关种质的保存实践（张玉芹等，2004；王艳军等，2005；李锡香等，2006）。
③ 濡备綍淇濇姢閲庣敓锷ㄦ岖墿璧勬簮
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